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SCIBEN转印仪

产品编号: ZYY1810M

产品规格: ZYY1810M


  

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  • SCIBEN转印仪说明书

    SCIBEN转印仪是用具有强耐腐蚀的铂钛阳极板和合金阴极板供电,其高效转印效力基于它的超大表面平板电极,形成的强劲而单一的磁场电流,相对于常规转印仪,只需要更低的电压就可以达到相同的效果。常规转印仪一次最多转印2张膜,而SCIBEN转印仪一次转印的数量可达6~8张膜,极其高效。

    装载 SCIBEN转印仪:

    1、把收纳凹槽放在比较光滑的表面。

    2、在收纳凹槽底部放一个网格屏(可选)。

    3、把阴极放在收纳凹槽底部,香蕉接头向上应该在左上角(注意:不要使用阳极板作阴极)。

    4、把一个网格屏,肋边向下,放在阴极板上。

    5、将转印衬垫放在收纳凹槽中,加入转膜印迹缓冲液使凹槽在含有衬垫的情况下保持水平状态。挤压垫子以排出所有气泡。

    6、将一块滤纸或色谱纸切成转印衬垫的大小,放在转印衬垫上。注意一定不要在滤纸下存有气泡;不要使用所谓的厚实,阻碍电流的“转膜纸”。

    7、把凝胶放在滤纸上。通过粘附到湿的滤纸。

    8、将预润湿的NC或PVDF膜放在凝胶上。方法是将一张转印膜用镊子捏住一端,并慢慢下垂让另一端首先接触凝胶。慢慢地放下,注意避免在膜与凝胶之间产生气泡。

    9、挤压转印膜, 从凝胶和膜之间排出多余的缓冲液。如果不这样做, 将导致转膜效果模糊。你甚至可以在凝胶上滚动一个玻璃棒来做到这一点。在收纳凹槽中不要有太多的缓冲液, 这样做或膜会容易漂浮在凝胶上。

    10、把一张滤纸放在膜上,小心不要带有任何气泡。

    11、将转印衬垫放在过滤纸上(当转印衬垫是新的时,通常用2个垫子就够了。当它们因为使用而扁平,增加到3-5个),并增加缓冲液,直到收纳凹槽几乎满为止。第二个或更多的凝胶可以放在这些转印衬垫之间进行。

    12、放置一个网格屏,肋部向上放在转印衬垫上,在上面放置阳极板(香蕉连接器应该在右上角)。

    13、将双孔电极盖板放在阳极板上。

    14、三明治需要压缩约2毫米来放入收纳凹槽托架里。如果没有,在电转印过程中,凝胶可能会滑。另一个转印衬垫应添加到三明治中。注意在上述的#11中压平。

    15、保持收纳凹槽水平,将收纳凹槽滑入收纳凹槽托架。小心不要夹到收纳凹槽和收纳凹槽托架之间的电极盖,因为收纳凹槽将堵塞,很难取出。

    16、慢慢地移动整个SCIBEN转印仪到垂直位置。如果出现转膜印迹缓冲液不能覆盖转印装置的情况,则添加部分缓冲液。

    17、将SCIBEN转印仪连接到电泳电源上,接通电源开始转膜。左手连接是阴极(-);右手连接是阳极(+)。

    18、在转膜过程中监测温度(一般在4-8度环境中实验)。

  • SCIBEN转印仪是用具有强耐腐蚀的铂钛阳极板和合金阴极板供电,形成的强劲而单一的磁场电流。常规的转印仪由于需要穿过围绕电极的一圈气泡而损失掉大量的电场。

    使用该设备注意以下几点:

    1.切记勿用铂钛电极作为阴极,勿擦拭铂的表面;

    2.氯离子损害所有阳极,切勿用HCl调节转印缓冲液的pH值;

    3.当驱动SDS-PAGE凝胶时,由于分离胶含有氯离子,需要将溴酚蓝跑到底部或脱离凝胶为止。

  • 问题1:如果在转膜后蛋白质从介质中被洗掉时怎么处理?

    可能的原因:洗涤剂在媒介洗涤去除蛋白质,需要改变成吐温和NP-40,或去除洗涤剂。

    问题2:在常规转印仪中难免出现印迹污染或模糊,如果这种情况出现怎么处理?

    可能的原因:在凝胶和介质之间的液体太多;转印衬垫太老或太平;在转膜过程中胶滑动了;在转膜中凝胶平衡不当或者出现收缩;探测程序不正确;蛋白过度上样使胶孔堵塞从而在转膜到0.2 mm硝基纤维素膜时模糊;PVDF膜与缓冲液的平衡不足。

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